您現(xiàn)在的位置是:首頁 >要聞 > 2023-08-30 00:48:14 來源:
雙縮脲反應方程式(雙縮脲反應)
大家好,我是小夏,我來為大家解答以上問題。雙縮脲反應方程式,雙縮脲反應很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來看看吧!
1、雙縮脲試劑 雙縮脲反應產物 雙縮脲結構雙縮脲試劑是由雙縮脲試劑A和雙縮脲試劑B兩種試劑組成. 雙縮脲試劑A的成分是氫氧化鈉的質量分數(shù)為0.1 g/mL的水溶液; 雙縮脲試劑B的成分是硫酸銅的質量分數(shù)為0.01 g/mL的水溶液。
2、 雙縮脲試劑可以驗證蛋白質的存在。
3、 具體方法是: 先將雙縮脲試劑A加入組織樣液,搖蕩均勻(必須營造堿性環(huán)境),再加入雙縮脲試劑B,搖蕩均勻。
4、如果組織里含有蛋白質,那么會看到溶液變成紫色。
5、具有兩個或兩個以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產生紫色反應。
6、蛋白質的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡合成紫紅色的化合物。
7、顏色深淺與蛋白質濃度成正比。
8、 雙縮脲(NH2CONHCONH2)是兩個分子脲經180℃左右加熱,放出一個分子氨后得到的產物。
9、 雙縮脲試劑本是用來檢測雙縮脲,因蛋白質中也有-CONH-基也可用于檢驗蛋白質,與蛋白質接觸后的顏色呈紫色。
10、 雙縮脲反應 紫色絡合物分子結構式 在堿性溶液(NaOH)中,雙縮脲(H2NOC-NH-CONH2)能與銅離子(Cu2+)作用,形成紫色絡合物(該物質的分子結構式見圖),該反應即雙縮脲反應。
11、 雙縮脲反應是肽和蛋白質所特有的,而為氨基酸所沒有的一種顏色反應。
12、一般分子中含有兩個氨基甲酪基(即肽鍵:-CO-NH-)的化合物與堿性 銅溶液作用,就會形成紫色或藍紫色絡合物。
13、 注:除-CO-NH-有此反應外,(-CONH2-)、(-CH2-)、(-NH2-)、(-CS-CS-NH2)等基團亦有此反應。
14、 雙縮脲反應的應用 蛋白質鑒定 由于蛋白質分子中含有很多與雙縮脲結構相似的肽鍵,因此也能與銅離子在堿性溶液中發(fā)生雙縮脲反應,且顏色深淺與蛋白質的含量的關系在一定范圍內符合比爾定律,而與蛋白質的氨基酸組成及分子量無關,故可用雙縮脲法測定蛋白質的含量(借助分光光度計可減小誤差)。
15、 雙縮脲反應主要涉及肽鍵,因此受蛋白質特異性影響較小。
16、且使用試劑價廉易得,操作簡便,可測定的范圍為1~10mg蛋白質,適于精度要求不太高的蛋白質含量的測定,能測出的蛋白質含量須在約0.5mg以上。
17、雙縮脲法的缺點是精確度低、所需樣品量大。
18、干擾此測定的物質包括在性質上是氨基酸或肽的緩沖液,如TrIs緩沖液,因為它們產生陽性呈色反應,銅離子也容易被還原,有時出現(xiàn)紅色沉淀。
本文到此講解完畢了,希望對大家有幫助。