大家好，我是小夏，我來為大家解答以上問題。巢式pcr優(yōu)點(diǎn)，巢式pcr很多人還不知道，現(xiàn)在讓我們一起來看看吧！

1、巢式PCR（nest PCR），使用兩對(duì)引物對(duì)目的基因進(jìn)行擴(kuò)增的一種PCR技術(shù)。首先在該基因起始密碼子上游數(shù)百bp和終止密碼子下游數(shù)百bp位置設(shè)置一對(duì)引物，這對(duì)引物由于可操控性大，可以將Tm值，引物結(jié)構(gòu)等設(shè)置到最佳?；蛘呖梢酝ㄟ^軟件自動(dòng)分析，由機(jī)器給出引物序列。然后再在目的基因的準(zhǔn)確位置設(shè)計(jì)第二對(duì)引物。

2、在進(jìn)行PCR時(shí)，先用第一對(duì)引物進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增后跑膠檢測(cè)，如果此時(shí)跑膠已經(jīng)可以檢測(cè)出較好的條帶，可以進(jìn)行回收純化，再將回收產(chǎn)物作為模板，用第二對(duì)引物進(jìn)行第二輪擴(kuò)增。如果第一輪產(chǎn)物跑膠時(shí)看不清楚條帶，則可以將產(chǎn)物適當(dāng)稀釋，以此作為第二輪的模板進(jìn)行擴(kuò)增，一般在第一輪以低拷貝量存在的DNA通過第二輪的擴(kuò)增都可以成功獲得的。祝你成功。

3、想要獲得基因克隆，真核或者原核表達(dá)載體的話，我們百替生物也可以提供此類服務(wù)！公司網(wǎng)址：http://www.100biotech.com/index.php

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