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        斐林試劑檢測(cè)還原糖原理(菲林試劑)

        導(dǎo)讀 大家好,我是小夏,我來(lái)為大家解答以上問題。斐林試劑檢測(cè)還原糖原理,菲林試劑很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!1、斐林試劑和班...

        大家好,我是小夏,我來(lái)為大家解答以上問題。斐林試劑檢測(cè)還原糖原理,菲林試劑很多人還不知道,現(xiàn)在讓我們一起來(lái)看看吧!

        1、斐林試劑和班氏試劑的使用方法及原理不盡相同。斐林試劑和班氏試劑都是檢驗(yàn)還原性糖的試劑,二者的使用方法及原理、成分也有區(qū)別,下面就從這幾種試劑的使用原理、成分及使用方法等方面做一簡(jiǎn)單總結(jié)。

        2、斐林試劑和班氏試劑

        3、關(guān)于斐林試劑和班氏試劑,可用下面的例題引出其異同點(diǎn):例:你可用什么方法,檢驗(yàn)人的尿液中是否含有糖?

        4、答案:

        5、方法一:在試管中加入人的尿液0.1mL,加入班氏糖定性試劑1mL,混合均勻后,將試管放入盛有開水的燒杯中,加熱煮沸1min~2min,若試管中溶液在加熱后產(chǎn)生了磚紅色沉淀,說(shuō)明尿液中含有糖。

        6、方法二:取少許尿液加水稀釋后,加入剛配制好的斐林試劑,沸水浴加熱后,若出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說(shuō)明尿液中含有糖。

        7、方法三:取少許尿液加水稀釋后,加入少許Cu(OH)2懸濁液(新制)加熱,若出現(xiàn)磚紅色沉淀,則說(shuō)明尿液中含有糖。

        8、由以上例題可以看出,斐林試劑和班氏試劑都能用于鑒定可溶性還原糖(上題中檢驗(yàn)的是葡萄糖)的存在,二者有相同點(diǎn),也有不同點(diǎn)。

        9、二者的不同點(diǎn)歸納

        10、(1)班氏試劑常用于尿糖的鑒定,其配方與斐林試劑不一樣,其配方為:

        11、①400mL水中加85g檸檬酸鈉和50g無(wú)水碳酸鈉;

        12、②50mL加熱的水中加入8.5g無(wú)水硫酸銅。制成溶液;

        13、③把CuSO4溶液倒入檸檬酸鈉溶液中,邊加邊攪,如產(chǎn)生沉淀可濾去。

        14、(2)其反應(yīng)原理與斐林試劑略有差別。利用斐林試劑鑒定時(shí),斐林試劑甲和斐林試劑乙直接反應(yīng)生成酒石酸絡(luò)銅離子

        15、酒石酸絡(luò)銅離子和可溶性還原糖在加熱條件下反應(yīng)產(chǎn)生磚紅色沉淀。而班氏試劑中的產(chǎn)生卻是這樣的:檸檬酸鈉作為絡(luò)合劑,由碳酸鈉提供堿性。CuSO4與檸檬酸鈉溶液和Na2CO3溶液混合時(shí)生成檸檬酸絡(luò)銅離子,檸檬酸絡(luò)銅離子與葡萄糖中的醛基反應(yīng)生成磚紅色沉淀。

        16、(3)兩種試劑的保存方式不同。斐林試劑甲和斐林試劑乙混合后會(huì)因酒石酸有一定的還原性而自發(fā)地緩慢產(chǎn)生氧化亞銅沉淀,因此斐林試劑一般為現(xiàn)用現(xiàn)配;而班氏試劑的配方中,檸檬酸鈉比較穩(wěn)定,實(shí)際堿性也不強(qiáng),不易還原銅離子產(chǎn)生氧化亞銅沉淀,因此該試劑可長(zhǎng)期保存。

        17、當(dāng)然,無(wú)論用班氏試劑還是斐林試劑,歸根結(jié)底都是二價(jià)銅與醛基在沸水浴加熱條件下反應(yīng)而生成磚紅色的沉淀,兩者反應(yīng)現(xiàn)象一樣,這就是二者的相同之處。 斐林試劑和雙縮脲試劑

        18、斐林試劑和雙縮脲試劑都由NaOH溶液(斐林試劑中還有酒石酸鉀鈉)和CuSO4溶液組成,但二者有如下三點(diǎn)不同:

        19、(1)溶液濃度不同

        20、CuSO4溶液稱為斐林試劑乙,其濃度為0.05 g/mL;

        21、CuSO4溶液(雙縮脲試劑B)的濃度為0.01 g/mL。

        22、(2)使用原理不同

        23、斐林試劑是新配制的溶液,它在加熱條件下與醛基反應(yīng),被還原成磚紅色的沉淀,可用于鑒定可溶性還原糖的存在。用斐林試劑鑒定可溶性還原糖時(shí),溶液的顏色變化過(guò)程為:淺藍(lán)色→棕色→磚紅色(沉淀)。

        24、鑒定生物組織中是否含有蛋白質(zhì)時(shí),常用雙縮脲法,使用的是雙縮脲試劑,發(fā)生的是雙縮脲反應(yīng)。具有兩個(gè)或兩個(gè)以上肽鍵的化合物皆可與雙縮脲試劑產(chǎn)生紫色反應(yīng)。蛋白質(zhì)的肽鍵在堿性溶液中能與Cu2+絡(luò)合成紫紅色的化合物。顏色深淺與蛋白質(zhì)濃度成正比。

        25、(3)使用方法不同

        26、斐林試劑使用時(shí),先等體積混合甲、乙兩液,而后立即使用,反應(yīng)需要加熱(有時(shí)不加熱也反應(yīng));雙縮脲試劑使用時(shí),先加入NaOH溶液(1mL),振蕩搖勻,造成堿性的反應(yīng)環(huán)境,然后再加入3~4滴CuSO4溶液,振蕩搖勻后觀察現(xiàn)象。

        本文到此講解完畢了,希望對(duì)大家有幫助。